Иммунологические методы диагностики сифилиса

Сифилис — диагностика

Лабороторные и иммунологические методы обследования стоматологического больного Проверенный сайт новейших иллюстраций

Диагностика сифилиса зачастую представляет сложности. Наибольшую сложность в диагностике представляют хронические формы сифилиса, вторичный сифилис, латентная фаза сифилитического поражения. Однако выявление данного заболевания должно строиться по стандартной схеме.

Обращение к врачу венерологу – зачем это нужно?

На первом этапе диагностики необходима личная консультация врача венеролога. На основании личной консультации врач венеролог в состоянии выставить клинический диагноз.

Анамнез – сбор необходимой для выявления диагноза информации: жалобы пациента, информация о некоторых аспектах половой жизни и контактах с подозрительными на наличие венерических заболеваний лицами. Перенесенные в прошлом венерические заболевания, информация о результатах их лечения. Вся эта информация позволяет лечащему врачу сконцентрироваться на наиболее вероятных заболеваниях заставивших пациента обратиться за специализированной помощью.

Далее следует клинический осмотр. Наиболее внимательному осмотру подвергаются слизистые и кожные покровы половых органов, область ануса, слизистая ротовой полости. Повышенное внимание уделяется ощупыванию наружных групп лимфоузлов, ощупыванию выявленных инфекционно некротических очагов. Часто на данном этапе диагноз сифилиса с достаточно высокой степенью вероятности можно выставить.

Однако для выставления окончательного диагноза, а так же для слежения за динамикой процесса в ходе проводимого лечения, необходимо проведение лабораторных анализов .

Лабораторное подтверждение сифилиса – что в себя включает и как производится?

Лабораторную диагностику сифилиса можно разделить на 2 группы проводимых исследований: первая позволяет выявить непосредственно возбудителя сифилиса, вторая же выявляет иммунологические изменения, происходящие в организме при сифилисе.

Как можно выявить непосредственно возбудителя сифилиса – бледную трепонему?

1. Темнопольная микроскопия. Вследствие некоторых внешних особенностей бледная трепонема плохо окрашивается традиционными красителями, используемыми в микроскопии бактерий. Потому имеется смысл использование специального темнопольного микроскопа. В нем на фоне темного фона хорошо контрастируется спиралевидная полоска — бледная трепонема.

Биоматериал для темнопольной микроскопии берется из первичного очага инфекции – из сифилитической специфической язвы, кожной сыпи, эрозии.

Лабороторные и иммунологические методы обследования стоматологического больного Проверенный сайт новейших иллюстраций

2. Прямая реакция флюоресценции. Данному методу диагностики предшествует обработка биоматериала специальной флюоресцирующей сывороткой, что приводит к прикреплению на поверхности бледной трепонемы специфических иммунных комплексов. В результате этой реакции при микроскопии обработанного биоматериала в люминесцентном микроскопе бледная трепонема выглядит светящейся и нарядной.

3. ПЦР (полимеразная цепная реакция ). Данный метод позволяет выявить ДНК инфекционного агента, делая его присутствие в организме пациента явным.

Как выявляются иммунологические признаки наличия сифилиса, и зачем их нужно выявлять?

Вся группа исследований иммунологических показателей с целью диагностики инфекционных заболеваний называется серологией. В наше время существует множество серологических методов диагностики, однако всех их объединяет то, что в диагностике биоматериалом является кровь пациента. В отношении диагностики сифилиса все серологические тесты можно разделить на трепонемные – выявляющие антитела против структурных элементов бледной трепонемы и нетрепонемные – выявляющие иммунологические изменения, связанные с последствием деятельности бактерии.

Нетрепонемная серология

1. Микрореакция преципитации (VDRL). Данное исследование выявляет в крови пациента антитела, вырабатываемые иммунной системой против клеток, поврежденных бледной трепонемой. Данный тест обладает высокой достоверностью, но малой специфичностью. Дело в том, что выявляемые антитела могут присутствовать в крови при многих заболеваниях и патологических состояниях. Потому данный тест используют лишь как скрининг заболевания, выявляющий подозрение на заболевание. Однако этот метод обладает неоценимым преимуществом в диагностике эффективности проводимого лечения. В случае излечения пациента микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном становится негативной в отличие от других серологических видов исследования, которые еще долгое время могут давать положительный результат.

2. Реакция Вассермана. Данное исследование связано с реакцией связывания комплемента – один из механизмов реализации иммунологического ответа.

Тест оценивается в плюсах (не в крестах, как считают многие! ). И реакция бывает отрицательной (в результате обследования указывается минус ), сомнительной (в результате обследования указывается 1 плюс + ), слабоположительной (в результате обследования указывается 2 плюса ++ ), положительная реакция (в результате обследования указывается 3 плюса +++ ), резко положительная реакция (в результате обследования указывается 4 плюса ++++ ).

Трепонемная серология

1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный вид исследования выявляет антитела, вырабатываемые иммунной системой инфицированного человека. Для этого производится взаимодействие сыворотки крови пациента и специфического препарата, содержащего антитела. После смешивания плазмы крови пациента и реактива со специфическими антителами, меченными специальным флюоресцирующим веществом, происходит их связывание. Исследование производится посредством специального люминесцентного микроскопа.

2. Иммуноферментный анализ (ИФА). О данном анализе стоит рассказать поподробнее. Так как он является основным при выявлении большинства инфекционных заболеваний. Основан метод на избирательной высокоспецифичной реакции антиген – антитело. Одной из особенностей данного анализа является то, что с его помощью можно выявить антитела различных классов (IgA IgM IgG ). Так же важным является способность данного анализа определять количество выявляемых антител. В итоге определение типа антител и его количественной составляющей позволяет сделать ряд выводов о длительности заболевания, динамике процесса, активности возбудителя и иммунной системы пациента. В итоге данный анализ оказался незаменимым в деле диагностики инфекционных заболеваний, а так же как контроль динамики заболевания на фоне проводимого лечения.

3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Данная реакция основывается на иммунологически индуцированном склеивании эритроцитов. Механизм данной реакции заключается в том, что предварительно подготавливаются эритроциты, на поверхности которых фиксированы белковые компоненты бледной трепонемы. Потому, при смешивании с плазмой крови, содержащей антитела к трепонеме, происходит склеивание эритроцитов – кровь из красной превращается в зернистую. Положительной реакция гемагглютинации становится спустя 4 недели после инфицирования. После успешного лечения сифилиса данная реакция в течение всей жизни может оставаться положительной.

Из вышеизложенного понятно, что дело диагностики, контроля эффективности лечения и излеченности – достаточно сложная и трудоемкая работа. А уж пациенту, не имеющему медицинского образования разобраться в целях и результатах исследования невозможно. Однако мы постараемся изложить в доступной форме динамику иммунологических изменений на разных стадиях сифилиса, и лабораторные показатели выявляющие данные изменения.

Презентация на тему: "Спирохетозы Возбудитель сифилиса Возбудитель лептоспироза Возбудитель возвратного тифа Лекцию читает к.б.н

Итак – немного теории. После инфицирования иммунные клетки впервые встречаются с бледной трепонемой. Идентифицируя ее как чужеродный микроорганизм, иммунокомпетентные клетки начинают активное формирование иммунного ответа. Антитела, специфически действующие на бледные трепонемы класса IgM. обнаруживаются в крови пациента спустя 7 дней после инфицирования, антитела IgG синтезируются позже – спустя через 4 недели. Эти 2 класса антител различны по своей структуре, но важно для диагностики то, что IgM синтезируется на ранних стадиях инфицирования (что говорит о недавнем инфицировании ) или при наличии высокой активности инфекции. Выявление IgG говорит лишь о формировании стойкого иммунитета к данной инфекции, лишь серия анализов титра антител в динамике позволяет оценить излеченность заболевания или активность инфекции. Антилипидные (неспецифические ) иммунологические комплексы активно синтезируются спустя 4 — 5 недель после инфицирования.

Важными является тот факт, что в период клинических проявлений сифилиса в крови выявляются специфичные для бледной трепонемы антитела как IgM. так и класса IgG (суммарные антитела ). Важным параметром в процессе лечения является изменение количественных параметров антител. Правильно подобранное лечение способствует резкому снижению концентрации IgM. на фоне стабильного уровня IgG – эти показатели говорят о сформировавшемся стойком иммунитете к бледной трепонеме на фоне снижения ее инфекционной активности. Необходимо обратить внимание на то, что специфические антитела к трепонеме могут сохраняться в крови человека на долгие годы, давая положительные результаты некоторых видов исследований.

Как же интерпретировать результаты серологических исследований?

В настоящее время в медицинской практике нашли широкое применение 3 реакции: микрореакция преципитации, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).

микрореакция преципитации

реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Источник: http://www.tiensmed.ru/news/sifilis-diagnostika1.html

Диагностика сифилиса

Как ставится диагноз сифилиса

Также применяются и рутинные методы исследования — общие анализы крови и мочи,биохимический анализ крови и.т.д.

Что такое серологическая диагностика сифилиса

В большинстве случаев обнаружить возбудителя сифилиса невозможно или обнаружение

его затруднительно.Поэтому для диагностики сифилиса применяют так называемое серологическую диагностику,основанную на определении различных видов и классов антител,которые организм выработал с целью своей защиты от сифилитической инфекции т.е определяется не возбудитель инфекции,а как организм прореагировал на его появление.

Алгоритм лабораторной диагностики сифилиса - презентация, доклад, проект

Серологическое исследование (от от лат. serum — сыворотка) представляет собой лабораторный анализ плазмы каппилярной или венозной крови основаный на иммунологической реакции антиген-антитело.

В качестве антигенов используют фабрично изготовленные препараты,аналогичные по своей структуре антигенам липидов,появляющихся в организме при разрушении тканей бледной спирохетой,липидам ее мембран и специфическим молекулярным соединениям,входящих в состав мебраны бледной спирохеты (для этих целей используются очищенные и ультраозвученные штаммы трепонем или выделенные от них рекомбинантные антигены).

В лабораторных условиях к антигенам добавляется сыворотка крови обследуемого.Если в сыворотке (плазме) крови присутствуют антитела происходит реакция антиген-антитело и ее результаты обнаруживаются различными методами (положительный результат) при отсутствии антител реакция не происходит (отрицательный результат).Серологическую диагностику сифилиса осуществляют в следующих случаях.

Скрининг на сифилис

Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.Скринингу на сифилис подвергаются:

  • Беременные женщины
  • Доноры крови и органов для трансплантации
  • Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
  • Военнослужащие
  • Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
  • Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
  • Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация — в России,странах СНГ и некоторых других странах)
  • Иммунологические методы в профилактике, диагностике и лечении инфекционных болезней - online presentation

    Диагностика сифилиса

    Для диагностики сифилиса применяются комбинация нетрепонемных и трепонемных тестов на сифилис или только трепонемные (подтверждающие) реакции.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

    • Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
    • Лицам с любыми генитальными язвами
    • Лицам — половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
    • Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
    • Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
    • Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)
    • Контроль за лечением сифилиса

      Применяются нетрепонемные тесты,так трепонемные тесты остаются положительными продолжительное время после лечения,а иногда всю жизнь.

      Что такое нетрепонемные тесты

      Нетрепонемные тесты определяют антитела класса IgG и IgM к липидам(фосфолипидам),

      Сифилис лекция 1 2009 г. ГОУ ВПО
      Источник: http://venuro.ru/venera/diaglues.php

      Лабораторные методы диагностики сифилиса

      Содержание:

      Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

      Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

      Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

      Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

      При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

      Антитела к бледной трепонеме IgM

      Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса. через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

      Антитела к бледной трепонеме IgG

      Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

      Неспецифические антитела

      Диагностика сифилиса. Методы лабораторной диагностики сифилиса - презентация, доклад, проект

      Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

      Ложноположительные анализы на сифилис

      Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе,  онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

      Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

      Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

      Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

      1. Нетрепонемные тесты

      В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

      2. Трепонемные тесты

      В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

      3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

      Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.  

      Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

      Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

      Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом. в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

      Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

      Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

      Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

      Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

      Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

      Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

      При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

      Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

      Микрореакция преципитации (МРП)

      Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

      Источник: http://microbak.ru/infekcionnye-zabolevaniya/sifilis/diagnostika-sif.html

      Еще по теме:

      • Кровотечение маточное долго Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо нарушается их регулярность. Причины […]
      • Ибупрофен при маточных кровотечениях Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Что такое маточное кровотечение? Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо […]
      • Имбирь и маточные кровотечения Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо нарушается их регулярность. Причины […]
      • Кошка маточное кровотечение Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Что такое маточное кровотечение? Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо […]
      • Дицинон и миома матки Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Что такое маточное кровотечение? Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо […]
      • Калган маточные кровотечения Калган (лапчатка прямостоячая): свойства и применение в народной медицине Растение калган (лапчатка прямостоячая) издревле применялось в качестве средства, излечивающего болезни ЖКТ. Это растение по своему лечебному действию превосходит такие современные препараты, как аспирин и пенициллин. О том, какие формы препаратов калгана […]
      • Гормональные причины маточных кровотечений Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо нарушается их регулярность. Причины […]
      • Какого цвета маточное кровотечение Маточные кровотечения - причины и симптомы, как остановить. Дицинон при маточных кровотечениях Оглавление Маточное кровотечение представляет собой выделение крови из матки. В отличие от менструации. при маточном кровотечении изменяется либо длительность выделений и объем выделяемой крови, либо нарушается их регулярность. Причины […]
      • Красная щетка от эндометрита Красная щетка для женщин и мужчин Красная щетка – поистине уникальное растение, оказывающее всестороннее действие на организм, устраняющее гинекологические и эндокринные нарушения. О воздействии этого растения на мужской и женский организм, о специфике лечения препаратами красной щетки климакса, бесплодия, эрозии, поликистоза, […]
      • Дисплазия слизистой шейки матки Дисплазия шейки матки - что это? Дисплазия шейки матки – представляет собой структурные изменения строения слизистой шейки матки (относится к предраковым заболеваниям). Изменения на ранних стадиях дисплазии носят обратимый характер, потому необходимо своевременное выявление и лечение данного заболевания. Дисплазия шейки матки […]